質粒小提試劑盒
本試劑盒采用堿裂解法裂解細胞,再通過離心吸附柱在高鹽狀態下選擇性地吸附DNA 的方法達到快速純化質粒DNA的目的。適用于提取1-5ml過夜培養的大腸桿菌,質粒提取得率和質量與宿主菌的種類和培養條件,細胞的裂解,質??截悢?,質粒的穩定性,***等因素有關。高拷貝質粒*多可提取30ug質粒DNA,低拷貝質粒*多可提取12ug質粒DNA。
使用本試劑盒提取的質粒DNA可用于PCR、測序、酶切、連接、轉化、文庫篩選、體外翻譯、轉染一些常規的傳代細胞等實驗操作。
Cat.No. | KIT-PMN-50 | KIT-PMN-250 |
Buffer B | 30ml | 125ml |
Buffer S1 | 15ml | 75ml |
Buffer S2 | 15ml | 75ml |
Buffer S3 | 20ml | 100ml |
Buffer P | 30ml | 125ml |
Buffer W | 15ml | 35mlX2 |
Buffer E | 15ml | 60ml |
RNaseA | 150ul | 750ul |
吸附柱&2ml回收管 | 50個 | 250個 |
說明書 | 1 | 1 |
儲存條件
試劑盒于常溫運輸,未開啟的試劑盒可以于室溫(15-25℃)干燥條件下保存12個月。如需更長的保存時間,可將試劑盒置于2-8℃。
**次使用前將RNase A加入Buffer S1中,混勻后置于2-8℃保存,可穩定保存12個月以上。
2-8℃保存條件下,溶液可能產生沉淀,需在使用前將試劑盒內的溶液在室溫靜置一段時間,或在37℃水浴中預熱10 min,即可溶解沉淀。
注意事項(請務必在使用前仔細閱讀此注意事項。)
1.Buffer S1在使用前先加入RNase A(將試劑盒中提供的RNase A全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
2.使用前請先檢查Buffer B、Buffer S2和S3是否出現渾濁,如有混濁現象,可在37℃水浴中預熱10 min,即可恢復澄清。
3.所有離心步驟均為使用常規臺式離心機室溫下進行離心,速度為12,000rpm (~13,400×g )。
4.實驗前使用Buffer B處理吸附柱,可以*大限度激活硅基質膜,提高得率。用Buffer B處理過的柱子*好當天使用,放置時間過長會影響效果。
5.Buffer P可以有效去除殘留的蛋白污染,當宿主菌為endA+(TG1、BL21、HB101、 ET12567、JM系列)等核酸酶含量較高的菌株時,強烈推薦使用Buffer P。
6.如果所提質粒為低拷貝質?;虼笥?0kb的大質粒,建議使用5-10ml過夜培養的菌液,同時按照比例增加S1、S2、S3的用量,Buffer E應在65-70℃水浴預熱,在吸附和洗脫時適當延長時間,以增加提取效率。其他步驟相同。
貨號 |
品名 |
規格 |
KIT-PMN-50 |
KIT-PMN-50 質粒小提試劑盒 |
50次/盒 |
KIT-PMN-250 |
KIT-PMN-250 質粒小提試劑盒 |
250次/盒 |