文章詳情
簡單介紹:
DAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。
DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。
詳情介紹:
DAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。
DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。
DAPI的*大激發波長為340nm,*大發射波長為488nm;DAPI和雙鏈DNA結合后,*大激發波長為364nm,*大發射波長為454nm。
本DAPI溶液用水配制,加熱有助于溶解。
用于細胞核染色時,推薦的DAPI工作濃度為0.5-10μg/ml。
運輸與保存方法
常溫運輸。粉末在室溫下穩定,需避光儲存。
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
配制母液
用雙蒸水溶解,終濃度為1mg/ml。本產品不可以用緩沖液直接溶解。-20℃可保存1年,建議分裝保存,避免反復凍融。
使用方法
1.配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10μg/ml)。
2.固定的細胞或組織染色:
對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的*后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI 染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm,發射波長460nm。
3. 活細胞或組織染色:
a)細胞培養物中加入適量DAPI染色液,約1/10細胞培養基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培養細胞 10~20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm,發射波長460nm。
DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。
DAPI的*大激發波長為340nm,*大發射波長為488nm;DAPI和雙鏈DNA結合后,*大激發波長為364nm,*大發射波長為454nm。
本DAPI溶液用水配制,加熱有助于溶解。
用于細胞核染色時,推薦的DAPI工作濃度為0.5-10μg/ml。
運輸與保存方法
常溫運輸。粉末在室溫下穩定,需避光儲存。
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
配制母液
用雙蒸水溶解,終濃度為1mg/ml。本產品不可以用緩沖液直接溶解。-20℃可保存1年,建議分裝保存,避免反復凍融。
使用方法
1.配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10μg/ml)。
2.固定的細胞或組織染色:
對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的*后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI 染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm,發射波長460nm。
3. 活細胞或組織染色:
a)細胞培養物中加入適量DAPI染色液,約1/10細胞培養基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培養細胞 10~20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm,發射波長460nm。